學生姓名:
向宇晴
指導教授:
方翠筠
學期:
112下
摘 要:
紫菜 (Porphyra spp.) 為人類常食用之藻類之一，其分布廣泛，主要分布於寒帶、溫帶、亞熱帶以及熱帶水域，營養價值豐富，含有聚醣、蛋白質、脂肪酸、膳食纖維和礦物質等生理活性物質，目前已被發現具有抗氧化、抗發炎及降血脂等生理活性。紫菜寡醣 (Porphyran oligosaccharides) 為紫菜聚醣經由化學法、物理法或酵素法處理後所得之低聚物，具有分子量較低、溶解度較高及穩定性較高等特點，近年來越來越多的研究確定了紫菜聚醣和紫菜寡醣的多種生物活性和潛在應用，目前僅有少數紫菜聚醣酶被利用，故需發展更多具有高催化活性的紫菜聚醣酶，並應用蛋白質工程進行基於結構的設計，以增強其催化性能。故本篇研究目的將於大腸桿菌表現 Mariniflexile maritimum 來源之重組紫菜聚醣酶，使用不同的誘導物濃度及誘導時間，以獲得最佳的表現條件，並經純化得到高度純化的紫菜聚醣酶後，再進行酵素特性探討與產物分析。結果成功表現具有活性的 Mm-POR-270，其分子量約為 34 kDa，最適溫度為 30 C，在 Citric Acid -Na2HPO4 pH 7.0 之緩衝溶液中具有最適 pH 值，而在 Citric Acid - Na2HPO4 pH 6.0-7.0之緩衝溶液中具有最佳的 pH 值穩定性，添加鹽會顯著抑制 Mm-POR-270，另外，添加 Co2+ 顯著提升酵素之活性，Zn 2+ 則顯著抑制 Mm-POR-270 之活性，且由 TLC 結果可知 Mm-POR-270 可降解紫菜聚醣。
向宇晴.pdf