Marinobacter aquaeolei VT8 之脂肪醯基輔酶 A 還原酶特性及脂肪醇產量探討

學生姓名: 黃鈺婷
指導教授: 方翠筠
學  號: 10332012
學期: 103下
摘  要: 脂肪醇 (fatty alcohol) 廣泛存在於細菌、植物與哺乳動物等生物中,可作為植物表皮蠟質組成分,保護植物避免環境迫害;於細菌中則形成蠟酯儲存能量。 脂肪醇現已廣泛使用於化妝品、醫藥品和清潔與塑膠等化學工業。而生物需要透過脂肪醯基輔酶 A 還原酶將脂肪醯基輔酶 A (fatty acyl-CoA) 還原成脂肪醇,以做後續利用。本篇研究即探討原核生物之脂肪醯基輔酶 A 還原酶特性並評估是否能提供工業生產。本篇研究利用 Marinobacter aquaeolei VT8 基因體內脂肪醯基輔酶 A 還原酶序列表現酵素,此酵素為 maqu_2220 ,經研究後得知maqu_2220 可將脂肪醯基輔酶 A 還原成脂肪醇。後續研究酵素特性可知酵素將脂肪醯基輔酶 A 還原成脂肪醛後立即將脂肪醛還原為脂肪醇,而酵素應為四聚體的形式存在。確認 Marinobacter aquaeolei VT8 表現之脂肪醯基輔酶 A 還原酶可產生脂肪醇後,進行菌株的改良並評估是否能供工業生產。經過多種序列的產量交叉比較,顯示帶有硫脂酶 (thioesterase, TE) 中的 'tesA 序列、脂肪醯基輔酶 A 合成酶 (fatty acyl-coenzyme A synthase, fadD) 序列及 maqu_2220 序列其產量及產物較符合需求,經發酵培養後產量可達 1725mg/L,但仍然不足以提供工業生產,未來期望能更進一步改良菌株以增進產量,符合工業生產之需求。