Escherichia coli 來源植酸酶之熱穩定性探討

學生姓名: 方弘懿
指導教授: 方翠筠
學　　號: 10332041
學期: 103下
摘　　要: Escherichia coli 來源植酸酶 (EcAppA) 目前已應用於飼料工業，具廣泛 pH值作用範圍與高比活性等優點，然而熱穩定性不佳，限制其高溫產程，因此提昇酵素的熱穩定性為本次探討重點。首先探討影響蛋白質熱穩定性因素之一的鹽橋(salt bridge)，其作用類似於離子鍵，是因分子之間帶正或負電，而彼此互相吸引的靜電作用，對於蛋白質結構有穩定作用，而本次報告於 EcAppA 中利用突變增加或減少結構中的鹽橋，來觀察是否改善熱穩定性。之後比對兩種真菌來源且特性較佳之植酸酶序列，將可能改善特性之因子表現於 EcAppA 上，例如只於真核細胞發生的糖基化修飾。而固定化也是常見增加酵素穩定性的方式，使用特性為表面帶電、疏水性、粒徑小且是益生菌之 Bacillus polyfermenticus 孢子，吸附酵素並探討固定化酵素特性。