不同基材對 α-澱粉酶固定化之影響

學生姓名: 張哲源
指導教授: 方翠筠
學  號: 10332045
學期: 103下
摘  要: α-澱粉酶 (EC 3.2.1.1) 可將多醣中的 α-(1,4) 葡萄糖苷鍵水解,將大分子醣類水解成小分子。酵素經固定化後可提昇酵素穩定性、增加酵素重複使用率和易與反應液分離等優點。首篇以共價結合法將 α-澱粉酶固定在奈米碳酸鈣顆粒上,固定化效率為 199.43 mg/g,最適 pH 值為 6.5,最適溫度為 30oC,酵素經固定化後熱穩定性提昇,KM 值下降,經過 25 次反應後剩下約 18.2% 酵素活性,在溫度 4 oC 和 pH 值 6.5 的 10 mM 磷酸緩衝溶液環境保存 40 天,仍保有71% 酵素活性。第二篇是將 α-澱粉酶固定在聚對苯二甲酸乙二酯連接聚甲基丙烯酸環氧丙酯 (polyethylene terephthalate grafted polyglycidyl methacrylate;PET-g-PGMA) 纖維上,當 PET-g-PGMA 的連接率 (graft yield;GY) 為 60%、溫度50oC 和 pH 值 5.0 時固定化酵素具最大的活性, 經固定化後,KM 值增加,熱穩定性提高。在連續式反應器以流速 1 mL/min 和 10 mg/mL 澱粉反應,平均麥芽糖產率為409.31 mg/h 。最後將α- 澱粉酶固定在膨潤土 / 幾丁聚醣(bentonite/chitosan;BC) 複合物,在 pH 值 6.0、酵素濃度 0.8 mg/mL 和溫度30oC 時,吸附效果最佳,最適溫度和 pH 值分別為 35oC 和 7.0,經過 5 次反應後,仍具 87% 的酵素活性。