海馬體內不同胜肽及其活性評估

學生姓名: 歐倩妤
指導教授: 黃登福
學　　號: 10432060
學期: 104上
摘　　要: 海馬 (seahorse) 為中藥材之一，經磨粉後可得許多活性物質，對人體健康具有正面影響，但尚未確認其成分為何，本次報告以海馬經不同酵素水解法取得不同功能性胜肽後，進行活性評估並應用於醫學或保健食品之潛力。海馬 (Hippocampus trimaculatus) 體內之胜肽由反應曲面法得到複合酵素 (trypsin + alkaline protease) 最適條件，並經處理後可得水解程度 (hydrolysis degree; DH) 值為 14.41%，進行膠體管柱層析後以波峰 II# 進行 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl 自由基清除率 (DPPH free radical scavenging rate) 及超氧陰離子自由基清除率 (superoxide anion free radical scavenging rate) 檢測，其值分別為 26.14% 及 21.13%。海馬 (H. kuda bleeler) 體內萃取具抗發炎性的胜肽可間接抑制人類骨肉瘤細胞 MG-63 之侵襲，透過影響前發炎介質 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) 後，減少 reactive oxygen species (ROS) 生成、Rac1 的活化及基質金屬蛋白酶 (matrix metalloproteinases; MMPs) 的表現量，說明胜肽是抑制 MMPs 的表現，調控細胞內 Rac1-ROS 訊號進而影響骨肉瘤細胞的增生及轉移作用。海馬中萃取出具神經保護性胜肽 (H. trimaculatus-derived neuroprotective peptides; HTP-1) 之水解最優化條件溫度為 36.69℃、處理時間為 20.01 hr、2.02% 之酵素/基質比率 (enzyme/substrate ratio; E/S) 及 pH 7.34 條件下可得其細胞存活率為 94.61%，且 HTP-1 處理後對抗凋亡 B-cell CLL/lymphoma 2 (Bcl-2) 基因表現量具正相關性，進而了解對大鼠嗜鉻性瘤細胞株 (rat pheochromocytoma cell line) PC12細胞免於B-amyloid (AB42 誘導細胞凋亡之效果，初步判定對於阿茲海默症之病毒醫療上具有其潛力。