學生姓名:
劉奕德
指導教授:
張君如
學 號:
00239048
學期:
105上
摘 要:
開心散 (Kai-Xin-San, K) 及定志丸 (Ding-Zhi-Wan, D) 為治療神經疾病之中藥方，由人參 (Ginseng Radix et Rhizoma, GR)、遠志 (Polygalae Radix, PR)、石菖蒲 (Acori Tatarinowii Rhizoma, ATR) 及茯苓 (Poria, PO) 組成。大鼠腦部星狀細胞給予 K (0.5-50 μM) 24 小時後，可增加其神經生長因子 (nerve growth factor, NGF) 及神經滋養蛋白(neurotrophin, NT) 表現量。PC12 細胞給予 0.1~10 μg/mL K 與 D 48 小時後，使用
qPCR 分析發現可增加神經傳導物合成酶 Tyrosine hydroxylase 、 Aromatic acid decarboxylase 及 Dopamine-β-hydroxylase 之表現；而對於神經傳導物降解酶Monoamine oxidase A、Monoamine oxidase B 及 Catechol-O-methyltransferase 則有抑制效果。將 K (3 μg/mL) 與 NGF (0.5 ng/mL) 共培養 48 小時，可增加細胞神經纖維絲蛋白 (neurofilament proteins, NF) 表現。以 protein kinase A (PKA) 抑制劑 H89 (2 μM) 預處理 3 小時或給予 K 及 PKA 活化劑 Bt2-cAMP 48 小時後，發現 K+NGF 組之 NF 較他組佳，推論 K 可能透過 PKA 路徑刺激 PC12 細胞分化。將螢光素酶 (luciferase,Luc) 基因 (pNF68/pNF200-Luc) 轉染進入 PC12 細胞，再給予 50 ng/mL NGF、25μg/mL K 及 25 μg/mL GR、PR、ATR、PO 混合物，觀察到 K 組 Luc 活性比 GR、PR、ATR、PO 混合組佳。以加減方 K1:5 或 K 加入細胞培養 48 小時測其 pNF68/pNF200-Luc 活性，發現 K1:5 較 K 為佳。將 pNF68/pNF200-Luc 轉染 PC12 細胞預處理 H89(5 μM) 3 小時後，加入 30 μg/mL K1:5 作用 48 小時，發現其啟動 NF promoter 活性被H89 抑制，推測 K1:5 以 PKA 路徑作用。綜上，K 透過 PKA 路徑誘導神經細胞分化，可作為神經相關疾病之潛力治療藥物。
