學生姓名:
洪靖
指導教授:
方翠筠
學 號:
10532008
學期:
105上
摘 要:
增加熱穩定性是提升酵素工業利用性之主要目的之一，利用定位單點突變將脂肪酶 LipR3 突變成 LipR5，可增強其熱穩定性與活性，促使反應速率提高，半衰期增加，並且對極端條件 (pH 值、有機溶劑、抑制劑) 顯示出耐受性。以Bacillus licheniformis 脂肪酶為例，用 error-prone PCR (eP-PCR) 反應進行兩輪定向突變增加其熱穩定性、活性與有機溶性耐受性。第一與第二輪 eP-PCR 的反應後，篩選出 eP-231-51 和 eP-231-137 這兩株突變脂肪酶進行活性測定，其中含 eP-231-51 脂肪酶之熱穩定性比原生型脂肪酶高出 13.5 倍。此外與原生型相比，其催化效率提昇 30 ％。由於近年來能源短缺問題，將脂肪酶以海藻酸鈣固定化提升脂肪酶熱穩定性之技術成本過高，在工業應用上會有困難，因此後續研
究探討使用 Aspergillus oryzae 做為全細胞生物催化劑。將高熱穩定性之Geobacillus thermatenulatus 脂肪酶 BTL2 基因轉形至其中，可提升 BTL2 的熱穩定性、活性與有機溶劑耐受性，並使其高甲醇濃度下催化甲醇分解而不損失脂
25 肪酶活性，能夠做為生產生質柴油的最佳生物催化劑。
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