以不同來源之 α-澱粉酶進行純化後探討其特性及應用

學生姓名: 魏子庭
學期: 108上
摘　　要: α-澱粉酶(α-amylase)是一種水解澱粉的酵素,將澱粉分子中的 α-1,4 鍵分解為葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖和 α-極限糊精。本篇探討來自不同菌株的 α-澱粉酶之純化、特性及應用。來自 Anoxybacillussp. YIM 342 的 α-澱粉酶通過超過濾、硫酸銨分離和透析之後,使用凝膠過濾層析法進行純化,使用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)確定純化的 α-澱粉酶的分子量為 68 kDa。其 α-澱粉酶的最適溫度和 pH 分別為 80°C和 9.0,對直鏈澱粉和支鏈澱粉的高水解速率,顯示該酵素在澱粉降解中具有重要的應用潛力。由 Bacillus mojavensis SO-10 產生的熱穩定的生澱粉水解 α-澱粉酶,最大表現量為在 pH 7.0、35°C 培養 36 小時,純化後純度提升 34倍,分子量確定為 73 kDa,pH 5.0-6.0 和 70°C 時表現出最高的活性,在變性劑和重金屬離子存在下,此 α-澱粉酶活性仍沒有喪失,純化的酵素分別以 36.7%和39.2%的比例水解玉米和小麥穀粒的生澱粉。從米象(Sitophilus oryzae)中選殖出 α-澱粉酶基因並在 Yarrowia lipolytica Po1g 菌株中表現,通過硫酸銨沉澱和親和層析法進行純化。此 α-澱粉酶活性的最適條件為 pH 5.0 和溫度 40°C,且未顯示對Ca2+有必需要求,重組 α-澱粉酶似乎可以有效地消化豌豆、莧菜、糯玉米和糯米中的顆粒澱粉。綜合上述結果,期望 α-澱粉酶可以在未來更廣泛的應用在食品工業上。