高靜水壓輔助電漿破壁小球藻之蛋白質水解物調節膽固醇的效果

學生姓名: 顏薏貞
指導教授: 陳冠文
學　　號: 10732010
學期: 108下
摘　　要: 目前常用於降膽固醇之藥物為膽固醇合成抑制劑 Statins,係藉由抑制膽固醇合成酵素 HMG-CoA Reductase (3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA Reductase, HMGR) 的活性,達到降低膽固醇之功效;然而,服用此類藥物可能造成頭痛、噁心等副作用。目前已知含有大量蛋白質之小球藻具有降膽固醇的效果,但其堅實的細胞壁降低其消化與吸收的效果。現今常用的破壁方法如化學法、水浴法、酵素法等可能有藥劑污染的風險、價格昂貴與熱敏性營養素流失等問題,因此本研究欲以高壓加工技術 (High pressure processing,HPP) 結合大氣常壓噴射電漿 (Atmospheric pressure plasma jet, APPJ) 等非熱加工進行破壁,並經由高壓輔助酵素水解小球藻蛋白以產生生物活性胜肽,並探討其 HMGR 抑制效果。

小球藻 (Chlorella vulgaris) 以先 HPP (600 MPa, 3 min) 後 APPJ (10 kV, 15 min) 的方式 (HABC) 進行細胞破壁有最佳之破壁破壁率達 71.8% 與可溶性蛋白含量為11.23 mg/g;而經由 HPP (100 MPa, 50°C, 24 hr) 輔助 Protease N 水解 HABC 可得最高之 HMGR 抑制率為 77.07%。此水解物經模擬腸胃道消化 (Pepsin + Pancreatin) 後,其 HMGR 抑制率為 78.43%,將此水解物經 Sephadex G-25 膠體層析劃分後,以波峰D 具有最高的 HMGR 抑制率為 58.27%,其分子量範圍約為 370-420 Da。後續將進一步以 RP-HPLC 與 ESI/MS/MS 進行純化並鑑定其胜肽序列,期望為非熱加工技術之領域與降膽固醇之保健食品提供一個新的方向。