學生姓名:
劉昕
指導教授:
張君如
學期:
109上
摘 要:
本篇報告主要探討多醣在人類腸道 Caco-2 細胞之吸收及運輸機制。利用Caco-2 細 胞 模 型 測 定 富 含 硒 之 灰 樹 花 多 醣 (Se-enriched Grifola frondosapolysaccharids, Se-GFP-22) 之運輸及攝取，結果顯示 Se-GFP-22 之運輸和攝取為時間和濃度依賴性，其攝取途徑可能為巨胞飲作用，分析其 apparentpermeability coefficient (Papp) 可知其腸道滲透係數為中等；比較 Se-GFP-22 (有機硒) 和亞硒酸鈉 (無機硒) 在 Caco-2 細胞之運輸和攝取過程中硒含量的變化，結果顯示有機硒比無機硒更容易被吸收。將枸杞多醣 (Lycium barbariumpolysaccharides, LBP) 進行超過濾分離得 LBP > 10 kDa 和 LBP < 10 kDa。LBP> 10 kDa 可增強 RAW264.7 細胞之存活率並促進極化，還可調節 NO、TNF- 𝛼、IL-6 和 ROS 產生，並具有抗發炎和提升免疫力之作用；利用螢光染劑 FITC 和RBITC 標記 LBP，發現 LBP 可進入細胞並在溶酶體中累積，其運輸途徑為網格蛋白依賴型內吞作用。將 polymannuronic acid (PM) 和 polyguluronic acid (PG)分別標記 FITC，形成 F-PM 和 F-PG。接著，經由 Caco-2 細胞單層運輸實驗可發現 F-PM 和 F-PG 之運輸為時間和能量依賴性；預處理運輸抑制劑或以siRNA 抑制相關運輸蛋白表現，得知 F-PM 和 F-PG 之運輸途徑包括巨胞飲作用、網格蛋白和內陷蛋白依賴型內吞作用；此外預處理胞內運輸抑制劑發現 FPM 和 F-PG 之運輸過程與胞內體酸化和溶酶體有，且 F-PM 之運輸需經由微管蛋白；添加 chitosan 以破壞 tight junction 也會促進 F-PM 和 F-PG 運輸。綜合上述，Se-GFP-22 之攝取途徑可能為巨胞飲作用；LBP 之運輸途徑為網格蛋白依賴型內吞作用；F-PM 和 F-PG 之運輸途徑為巨胞飲作用、網格蛋白和內陷蛋白依賴型內吞作用。
20200930專題討論摘要_劉昕.pdf