學生姓名:
蘇建豪
指導教授:
方翠筠
學期:
109上
摘 要:
酶被認為是大自然的催化劑，脂肪酶 (Lipase, EC 3.1.1.3) 可將三酸甘油酯 (triglyceride)水解成甘油和游離脂肪酸，其中來自微生物的脂肪酶，因生產速度快、產量高且更穩定，因此人們認為微生物來源的脂肪酶最具有商業意義，故需對影響其活性因素有充分的了解。本篇報告旨在針對不同來源的脂肪酶在經過不同方法的純化過後，探討其特性分析與對於不同植物油的水解率。由 Aureobasidium pullulans S3 所得之脂肪酶以超過濾 (ultrafiltration) 和離子交換層析管柱 (DEAE-Sepharose Fast Flow) 純化後濃縮，最終純度提高 18.2 倍，活性回收率為 4.2%，最適條件為溫度 40℃、pH 7.0，在含有正己烷、氯化鈉、吐溫 80 與花生油皆有最好的活性表現。由 Geotrichum candidum UCMA91 透過硫酸銨沉澱後的脂肪酶以 Protein dialysis kit 濃縮，再以分子篩純化後酵素比活性為 54.26 U/mg ，相較粗酵素活性增加 62.36 倍，在 55℃與 pH 7 下具有最大的相對活性為 136.37%與 134.85%，卻在 EDTA 的抑制下剩 3.98%活性，而在大豆油擁有好的水解率。自 Aspergillus tamarii JGIF06 來源的脂肪酶經離子交換層析管柱和分子篩管柱 (Sephadex G200) 純化後酵素比活性增加了 7.9 倍，回收率為 43.1%，最適條件為溫度 37℃、pH4.0，在花生油作為基質時有最佳活性，含有 CTAB 的存在下保留了90.84%的活性，而氯化鈣 (CaCl2) 有略為促進其活性。綜合所述，不同來源的脂肪酶其最適生產條件，可應用於不同植物油的水解，並在工業上具有水解油脂潛力。
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