探討不同酵素之最適條件並用於生產塔格糖

學生姓名: 郭秝瑜
指導教授: 方翠筠
學期: 109下
摘  要: 塔格糖是存在自然界中稀有的己糖。甜度是蔗糖的 92%,提供的能量僅為蔗糖的1/3。其為具健康益處的益生元,有抗牙菌斑和抗口臭之功效,且為公認安全 (GRAS)。主要是 D-半乳糖藉由 L-阿拉伯糖異構酶 (EC 5.3.1.4) 生物合成的。本篇目的為探討不同酵素之最適條件並用於生產塔格糖。來自多黏菌阿拉伯異構酶經基因 PPAI 轉型後,透過鎳離子親和性管柱純化,分析其最適條件,並應用在洋蔥廢棄物上以生產塔格糖,結果顯示,PPAI 在 0.8 mM Mn2+、pH 7.5、30℃ 的條件下有最大的活性,可將 L-阿拉伯糖轉化 D-塔格糖,轉化率為 12.09%,並在 10g 的 OJR 中產生 0.99g 的 D-塔格糖。來自於植物乳桿菌的阿拉伯糖異構酶 araA 經基因轉型後,透過磷酸鹽緩衝液獲得全細胞,並將乳清採用乳糖水解的方式生產塔格糖,選出最適方法並探討其最適條件,結果表明,SSB 之最適條件為 50 ℃, pH 6.5, 5mM Mn2+,兩階段 SSB 後,其塔格糖的濃度為 51.5 g/L。而來自絲狀嗜熱桿菌 GatZ 基因轉型後,透過鎳離子親和性管柱純化,對其特性進行探討,並配合不同酵素生產塔格糖,結果顯示,在 pH 8.0, 70℃時有最佳的活性,對 Mg2+具有依賴性。使用雙酶系統生產塔格糖,可得到 4.1%的產率。使用多酶系統生產塔格糖,其最終轉化率為 35%。綜上所述,透過不同酵素作用於生產廢棄物中,且配合不同方法及條件,對於生產塔格糖具有極大之潛力。