探討不同來源之石蓴多醣裂解酶的特性

學生姓名: 楊侑丞
指導教授: 方翠筠
學期: 110上
摘　　要: 石蓴多醣是石蓴屬物種的細胞壁中的主要成分，佔其乾重 9~36%，是一種膠凝硫酸化多醣，具有許多生物活性功能。然而，其生物活性受其分子量與黏度的影響很大，與高分子量比低分子量的石蓴多醣具有更好的活用性，因此由石蓴多醣衍生的低聚醣越來越受到關注。現今製備石蓴多醣的方法大多為酸水解，這方法會使硫酸基丟失、產物複雜、低聚醣產率低，因此酵素法被認為是有潛力的方法。本篇報告目的為來自不同來源的石蓴多醣裂解酶的特性探討。來自 Formosa agariphila KMM 3901 的 FaPL28 基因以轉形方式送入 E.coli BL21(DE3)培養，經過收集純化後進行其最適條件與特性分析，結果顯示 FaPL28 的最適條件為 pH 8.0、29.5℃，且鹽濃度對其活性亦有影響。第二個為來自 Alteromonassp. A321 的 ALT3695 基因以轉形方式送入 E.coli BL21(DE3)培養，經過收集純化後進行其最適條件與特性分析，結果顯示 ALT3695 最適條件為 pH 8.0、50℃，表面活性劑與金屬螯合劑對其活性並無顯著效果，最後為來自 Alteromonas sp. LOR 的 AsPL 基因以轉形方式送入 E.coli BL21(DE3)培養，純化收集後進行分析，其最適條件為 pH 8.5、40℃，且發現其有極高的耐鹽性，2.5M 的鹽濃度下依然能有極高的活性，三種來源的石蓴多醣裂解酶皆在 Ca 2+的輔助下有最佳活性。