探討幾丁質去乙醯酶及其對幾丁質的影響

學生姓名: 陳育赯
指導教授: 蔡敏郎
學期: 111上
摘　　要: 幾丁質為自然界中含量最豐富的海洋生物聚合物，然而廣佈的氫鍵網絡，使其在大多數溶劑中的反應性和溶解性較差，因此需將其轉化為水溶性衍生物幾丁聚醣，商業上大多使用化學法，但會產生有毒和腐蝕性廢水、消耗大量能量及有去乙醯度(degree of deacetylation, DD)不均勻等問題，而酵素法則可避免這些問題，本研究目的為探討不同因子對幾丁質去乙醯酶(chitin deacetylase, CDA)活性的影響，並利用 CDA 使幾丁質去乙醯化為幾丁聚醣後進行性質分析。Bacillus aryabhattai B8W22 之幾丁質去乙醯酶(BaCDA)在純化 60 分鐘、pH 7 的 50 mM Tris-HCl 緩衝液、30 ºC、1 M NaCl、2 mM Mg2+ 時有最佳活性；Alcaligenes faecalis Alca F2018 之幾丁質去乙醯酶(AfCDA)在含有 0.04% (NH4)2SO4、0.015% KH2PO4 和 0.1%酵母萃取物的培養基 IV、pH 8、28 ºC、72 h、接種量 4000 μl、6000 mg/L NaCl、蔗糖作為碳源、蛋白腖作為氮源、150 rpm 的水平攪拌時有最佳活性；Microbacterium esteraromaticum MCDA02 之幾丁質去乙醯酶(MeCDA)在pH 8、30 °C、含有 K+、Li+和 Sr 22 2+時有最佳活性。篩選出不同 CDA 的最適條件，並以 CDA 將幾丁質中的乙醯胺基基團水解成幾丁聚醣，製備出的幾丁聚醣樣品與商業幾丁聚醣相似。