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探討禽類微生物分離菌株對抗生素抗藥性現象及菌株基因序列特徵

學生姓名: 唐鈺婷
指導教授: 林泓廷
學  期: 109下
摘  要: 禽類肉品為人類攝食的食品之一,其飼養過程已長期施用抗生素,進而導致禽類相關微生物產生抗藥性現象,而具抗藥性之微生物則有機會藉由食物鏈傳播至人體。本篇報告旨在探討從禽類中分離出來的微生物菌株其對抗生素的抗藥性現象,進而分析菌株的基因序列等特徵。從南非班德市區收集肉雞盲腸、糞便及肉樣品,分離樣品中金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus),並將分離菌株進行 DNA 萃取、利用 PCR 鑑定確認其是否為 S. aureus,對其進行抗生素敏感測定 (AST) 及篩選出抗藥性之基因。結果顯示,收集到的 194 個樣品中有
53.6% 樣品檢測出 S. aureus 陽性,而在所測試的 104 個分離菌株中皆對多種抗生素具有抗性;在 4 毒力基因編碼中只檢測出兩個,分別為 spa 及 coa;在分離菌株中含有 3 個抗藥性基因,分別為耐甲氧西林的基因編碼 mecA、耐 β -內醯胺酶的基因編碼 BlaZ 及耐四環素抗性的 tetK 基因。分別從新加坡傳統市場及超級市場收集 120 份及 150 份的冷藏雞肉,分離樣品中的沙門氏菌 (Salmonella)、鑑定其血清型,再將分離菌株進行 AST、多位點序列分型測試 (MLST) 及 PCR 鑑定其 gyrA 及 parC 基因是否突變。結果顯示,傳統市場雞肉樣品其 Salmonella 汙染程度顯著高於超級市場樣品,而所分離的 52 株 Salmonella 有 59.6% 具有多重抗藥性之現象;耐喹諾酮類抗生素的分離菌株在基因中發現其有 gyrA 的突變,但並未發現 parC 突變。接著從韓國傳統市場收集 152 隻雞、154 隻鴨樣品,從樣品中分離出彎曲桿菌 (Campylobacter) 並利用 PCR 鑑定其是否為 Campylobacter,再將分離菌株進行 AST、分析分離菌株基因多樣性及其細胞致死毒素基因 cdtA、cdtB 及 cdtC 是否存在。結果顯示,
與其他國家研究相比,韓國國內家禽畜體彎曲桿菌感染率相對較低。
Campylobacter 分離菌株對 nalidixic acid、ciprofloxacin 及 tetracycline 這三種抗
生素具有抗性,推斷出其較常對奎諾酮及氟奎諾酮類抗生素具有抗性,而在分離
菌株基因序列中發現具有高比例的 cdt 基因。綜上所述,錯誤的抗生素使用方
式造成抗藥性現象日趨嚴重,應對這些藥物之使用進行更嚴格控管及廣泛教育大
眾,減緩微生物之抗藥性。
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