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利用不同載體固定化對轉化酶之影響

學生姓名: 王映菩
指導教授: 方翠筠
學期: 110下
摘  要: 轉化酶可將蔗糖水解為廣泛用於食品和飲料的轉化糖漿,且該酵素在人造蜂蜜、化妝品、製藥和造紙工業中作為增塑劑使用。但是轉化酶在工業化生產過程中容易受到溫度與 pH 值的變化、環境施加的滲透壓影響而失活,而且游離的轉化酶不易從反應物中回收使其可重複使用率差。透過固定化轉化酶可以有效將酵素從反應物中分離出來,提升重複使用率並賦予其更好的穩定性,故本篇報告的目的為探討不同載體固定化作用對轉化酶活性及穩定性的影響。第一種載體為 Poly(N-vinylpyrrolidone-co-butylacrylate-co18 N-hydroxymethylacrylamide),固定化提高酵素對 pH 值和溫度的穩定性,且最適作用溫度提高 15 ℃,並在反應 30 天後保有 89 %的活性。第二、三種為海藻酸鈣與海藻酸鈣 κ-角叉菜膠,兩種載體皆能提高酵素對 pH 值和溫度的穩定性、具有較游離酶高的 Km 值,並在使用九次循環後保留 86 %的活性。第四種是碳水化合物結合模塊(CBM)融合於轉化酶後以特異性結合方式固定於纖維素,該載體沒有使酵素的 pH 值和熱穩定性提升,在蔗糖濃度小於 1M 時才有良好穩定性和重複使用率。綜上所述,並非每種載體進行轉化酶的固定化作用皆能提升酵素的活性和穩定性。針對不同生產條件與酵素來源使用合適的載體才能有效降低生產成本與延長產品壽命,開創轉化酶商業應用的發展潛力。
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