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植物蛋白水解物中二肽基肽酶-IV抑制胜肽的純化與鑑定

學生姓名: 陳芳綺
指導教授: 陳冠文
學期: 111上
摘  要: 糖尿病為台灣十大死因之ㄧ,其中第二型糖尿病 (Type 2 diabetes, T2D) 為最主要的糖尿病種類,而人體中的二肽基肽酶-IV (Dipeptidyl peptidase IV, DPP-IV) 會降解葡萄糖依賴性胰島素刺激胜肽 (Glucose-dependent insulinotropic peptide, GIP) 與類升糖素胜肽-1 (Glucagons-like peptide-1, GLP-1) 使其失活,從而減少胰島素的分泌。抑制 DPP-IV 被視為治療 T2D 的方法之一,有許多抑制 DPP-IV 的藥物會產生不良副作用如:頭痛、關節炎及上呼吸道感染等,因此尋找天然來源的食源性抑制劑已受到重視。本研究目的為利用體外分析藜麥蛋白水解物、納豆及高粱種子蛋白水解物之 DPP-IV 抑制活性,並從中分離與鑑定具有抑制能力之胜肽序列。藜麥蛋白經 Pepsin-Trypsin 水解後有最高的抑制活性,分離後使用超高壓液相層析串聯質譜儀 (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer, UPLC-MS/MS) 可鑑定出20 種 DPP-IV 抑制胜肽,其中 IPI 有最低的IC50值。納豆水溶性萃取物經測定後具有 DPP-IV 抑制能力,接著透過三階段的純化可鑑定出 KL 與 LR 兩種具有較高抑制活性的胜肽,其中 KL 的 IC50值最低,示為目前食物蛋白來源之雙胜肽中具有最高的 DPP-IV 抑制能力。高粱經體外腸胃道模擬試驗後可測定出 DPP-IV 抑制活性,經分離與純化後使用高效液相層析質譜儀 (High Resolution-Liquid Chromatography Mass Spectrometry, HR-LCMS) 鑑定出 5 種新穎性胜肽序列,其中 PEP4 (QLRDIVDK) 有最低的IC50值。綜合以上結果,3 種植物蛋白中皆可鑑定出具有 DPP-IV 抑制能力之胜肽,有利於作為第二型糖尿病之天然來源的抑制劑。
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