紅藻中 R-藻紅蛋白不同萃取與純化方法的比較
學生姓名:
蕭莉玟
指導教授:
宋文杰
學期:
111下
摘 要:
R-藻紅蛋白(R-phycoerythrin, R-PE)是一種存在於紅藻(Rhodophyta)中的水溶性蛋白質，主要功能爲捕獲光能量助於進行光合作用。由於其具有獨特的紅色螢光特性，經萃取純化後，在商業或工業上具有高度的經濟價值，普遍作爲螢光標記試劑或色素使用。此類蛋白質在提取後，必須對蛋白質提取物進行濃縮和預純化。這無論是在純度、產量還是成本效益方面，對於加工業都是一項挑戰。本文探討了 R-PE 在不同萃取與純化方法下受到的條件因素，並對其進行優化以取得最佳產量與純度。R-PE 經過吸附分離和離子交換層析的步驟最終產生了純化比 > 4 的 R-PE，但是在過程中流失了不少 R-PE，其產量與回收率最高僅達 30.34 mg 與 13.83 %。嘗試不同的吸附劑和奈米顆粒，通過優化緩衝液 pH 值、離子强度(ionic strength, IS)和吸附劑濃度之條件，從 R-PE 粗提取物中選擇性吸附其他污染生物分子來濃縮 R-PE。使用沸石吸附獲得的 R-PE 濃縮倍數與產量分別為 3.31 倍與 73.36 % ；使用金奈米顆粒則分別為 2.10 倍與 98.91 %。從磷酸鹽緩衝液獲得 R-PE 粗提物，使用 200 mM NaCl 在陰離子交換柱進行洗脫和顯色，獲得了 3.25的高純度指數。雖然吸附分離結合離子交換層析能取得最佳純度的 R-PE，而金奈米顆粒能取得最佳產率，但是其分別的產率與純度過低，不適用於工業的大規模操作。考慮到成本效益方面的問題，使用沸石選擇性吸附雜質以萃取純化 R-PE 為最佳選擇。
A班專題討論00839054蕭莉玟.pdf