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不同原料之胜肽螯合鈣的製備與對 Caco-2細胞單層鈣轉運之影響

學生姓名: 邱聖峰
指導教授: 蔡敏郎
學  期: 112上
摘  要: 胜肽螯合鈣可改善腸道吸收和生物利用度,通過較小分子或寡肽之途徑增強腸壁的吸收,同時具有更好的溶解性和熱穩定性,這些特性對於鈣通過食品加工和人體胃腸系統吸收鈣的持久性至關重。螯合物還能防止鈣離子在含有單寧、草酸鹽和植酸鹽的食物中沉澱,來提高鈣的生物利用度。Caco-2 細胞在腸道進行吸收試驗,由於其滲透特性與人體小腸類似,廣泛用於藥物或營養物質在小腸內的攝取轉運和代謝研究。本篇目的為探討不同原料包括酪蛋白水解物、白鯽魚皮與蛋清之胜肽螯合鈣的製備,與對 Caco-2 細胞單層鈣轉運之影響。酪蛋白水解物使用 Reversed phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC)對其進行分析,並得到 VLPVPQK (MW = 779.5 Da),經過紫外可見吸收光譜與 zeta 電位發現結構變化,在 Caco-2 單層細胞中以濃度依賴性方式有效增強鈣轉運及吸收,其鈣結合能力為 129.46 mg/g。白鯽魚皮製備之膠原蛋白胜肽 (white carp skin collagen peptide, CPLW)經超濾膜製備出≤3 kDa 之胜肽,其鈣結合能力 為 22.16 mg/g,同時在模擬胃腸道消化中,在高溫下的鈣保留率保持在 90%但是在酸性條件下,CPLW-Ca 的鈣含量顯著下降。蛋清胜肽(egg white peptides, EWPs)根據 Response Surface Methodology (RSM)最佳條件及酶解製備具有高鈣結合能力的胜肽,螯合率為 65.15%,在紫外可見吸收光譜與 Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR)結果發現 羧基氧和胺基氮在螯合過程中可能與鈣發生螯合,Scanning Electron Microscope (SEM) 圖顯示 EWPs 與鈣結合結構變為疏鬆多孔海綿,在 Caco-2 細胞單層中的鈣轉運活性顯 示 EWPs-Ca 可以顯著改善鈣轉運。綜合以上結果,不同來源之胜肽螯合鈣在 Caco-2 細胞中,皆可改善鈣在腸道吸收的方式及效果,進而提升胜肽螯合鈣的生物利用度。
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