探討化合物下調轉運幫浦之表現以增加抗藥性菌株對抗生素之敏感性
學生姓名:
黃芊允
指導教授:
林泓廷
學 期:
112上
摘 要:
細菌產生多重抗藥性的主要機制之一來自於細胞膜上轉運幫浦，細菌藉由轉運幫浦排出抗生素、染劑、重金屬等危害物質，藉以降低對抗生素敏感性、提升存活率，使得抗生素在臨床治療上受到限制，成為現今醫療中棘手的問題。其中轉運幫浦抑制劑是近年來常用於下調轉運幫浦表現的化合物，協同抗生素有效抑制細菌生長、提升菌株對抗生素之敏感性，轉運幫浦抑制劑的表現受到許多關注。本次三篇文獻旨在探討三種待測物 TXA01182、PMBN、resveratrol 在有效濃度下是否抑制轉運幫浦作用，並恢復菌株對抗生素的敏感性。首先測定待測物最小抑制濃度 (Minimum inhibitory concentration, MIC) 確認其有無抗菌活性，同時測試待測物是否協同抗生素作用，結果顯示三種待測物皆無抑菌活性，且 TXA01182 有效協同 levofloxacin 降低 8 倍 MIC 值、不同菌株中多黏菌素 B 九肽 (polymyxin B nonapeptide, PMBN) 與不同抗生素及轉運幫浦抑制劑 (Efflux pump inhibitors, EPIs) 組合產生協同作用、resveratrol 聯合 rifampicin 以及 chlorhexidine 使用時的微量抑制濃度指數 (Fractional inhibitory concentration index, FICI)數值皆 ≤ 0.5。透過螢光染劑累積確認 TXA01182 以及 resveratrol 是否下調轉運幫浦使得染劑不被轉運出菌體外，結果顯示溴化乙錠 (ethidium bromide, EtBr) 螢光染劑隨著 TXA01182 濃度的增加而累積、添加 resveratrol 和 3-chlorophenylhydrazone (CCCP)的螢光累積較控制組顯著的增加。待測物 PMBN 則是透過生物膜抑制試驗確認 PMBN 是否能有效抑制 P. aeruginosa Ps4 生物膜生成，結果顯示 50 倍 MIC 的 AZM/PAβN/PMBN 組合使菌數降低 7 log10 CFU/mL 有效抑制生物膜生成。最後三種待測物皆測試時間殺菌曲線，LVX (1 μg/mL) + TXA01182 (6.25 μg/mL) 組別有效降低 > 6 log10 (CFU/mL) 的菌數、僅 AZM/PAβN/PMBN 組合曲線下面積 (AUC) 顯著的抑制菌株生長 (**p < 0.01)、resveratrol 128 mg/L 與 0.25 x MIC chlorhexidine 組合 有效降低 約 3 log10 (CFU/mL) 的菌數，結果顯示待測物有效協同抗生素抑制抗藥性菌株的生長，綜合上述三篇文獻之研究結果顯示，待測物 TXA01182、PMBN、resveratrol 有效降低菌株抗藥性、提升抗藥性菌株對抗生素之敏感性，具有開發成轉運幫浦抑制劑的潛力。
1004_seminar_芊允_摘要.pdf