水產動物水解物之降血壓胜肽純化分離與活性探討
學生姓名:
陳亭屹
指導教授:
張祐維
學 號:
00139045
學期:
104下
摘 要:
水產動物蛋白質經過酵素水解方式，可以獲得具有生物活性之胜肽。Angiotensin-I-converting enzyme (ACE) 為人體調節血壓的酵素，會將 angiotensin-I 轉變成 angiotensin-II (血管收縮素)，以及催化 bradykinin (血管擴張素) 的降解。本報告主要探討水產動物水解物之降血壓胜肽純化分離與活性。長體蛇鯔、牙鮃和烏賊蛋白質水解物利用超過濾、膠體過濾層析法、逆向高效能層析儀和質譜儀純化 ACE 抑制胜肽序列，長體蛇鯔純化之 ACE 抑制胜肽序列為 Arg-Val-Cys-Leu-Pro (RVCLP)，而其 ACE 抑制活性 (IC50) 為 175 μM；牙鮃純化之 ACE 抑制胜肽序列為 Met-Glu-Val-Phe-Val-Pro (MEVFVP) 和 Val-Ser-Gln-Leu-Thr-Arg (VSQLTR)，而其 ACE 抑制活性 (IC50) 分別為 79 和 105 μM；烏賊純化之 ACE 抑制胜肽序列為 Val-Glu-Leu-Tyr-Pro (VELYP)，而其 ACE 抑制活性(IC50) 為 5.22 μM。牙鮃、烏賊純化之 ACE 抑制胜肽以不同的濃度，並且利用雙倒數圖 (Lineweaver-Burk plot) 進行 ACE 抑制型態測試。牙鮃純化之 ACE 抑制胜肽 MEVFVP、VSQLTR 分別為競爭型抑制劑和非競爭型抑制劑；烏賊純化之 ACE 抑制胜肽 VELYP 為非競爭型抑制劑。牙鮃、烏賊純化之 ACE 抑制胜肽進行自發性高血壓大鼠餵食實驗，分別餵食 MEVFVP、VSQLTR 和 VELYP，透過 tail–cuff method 量測大鼠尾部血壓，餵食牙鮃純化之 ACE 抑制胜肽 MEVFVP 和 VSQLTR 的組別，與未餵食的組別相比下自發性高血壓大鼠尾部收縮壓有顯著性降低 (P < 0.05)；餵食烏賊純化之胜肽 VELYP 的組別，與未餵食的組別相比下自發性高血壓大鼠尾部收縮壓有顯著性降低 (P < 0.01)。長體蛇鯔、牙鮃和烏賊蛋白質水解物之 ACE 抑制胜肽皆具有降血壓能力，未來可以應用於降血壓藥物和保健食品。
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