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海藻糖製備方式與毒性探討

學生姓名: 林銘彥
指導教授: 方翠筠
學  號: 40442019
學期: 103下
摘  要: 海藻糖 (trehalose) 為非還原二醣,由兩個葡萄糖以 α-1,1 鍵結而成,其甜度為蔗糖的 45%,具低齲齒性,不與食品產生梅納反應 (Higashiyama 2002),且有良好的生物保護性 (Gibson et al., 2008) 與保水性等,適合使用於食品工業中。
首篇作者以蔗糖為基質,利用澱粉蔗糖酶 (amylosucrase, ASase) 與麥芽寡糖苷海藻糖生成酶-水解酶 (maltooligosyltrehalose synthase-trehalohydrolase, MTSH) 生產海藻糖,並比較兩酵素以連續法與同時法在生產海藻糖上的產率,結果得知連續法 (3.15 ± 0.83 mM trehalose/20 mM sucrose) 較同時法 (1.43 ± 0.14 mM trehalose/20 mM sucrose) 具較高的海藻糖產率,顯示利用ASase由蔗糖生產麥芽寡糖 是海藻糖生合成的重要步驟。
第二篇作者使用 ASase、麥芽寡糖苷海藻糖生成酶 (maltooligosyltrehalose synthase, MTS) 與麥芽寡糖苷海藻糖水解酶 (maltooligosyltrehalose trehalohydrolase, MTH) ,形成仍具酵素活性之不可溶酵素,此產物稱混和交聯酵素聚集 (combined cross-linked enzyme aggregates, combi-CLEAs) 實現從蔗糖到海藻糖一步驟生物轉化,含有三種酵素的combi-CLEAs是分別用丙酮和戊二醛 (glutaraldehyde, GA)作為沈澱劑與交聯劑而成功建構。研究結果顯示酵素比例為8:0.5:0.5 (AS, 4 mg:MTS, 0.25 mg:MTH, 0.25 mg) 進行交聯具有最佳的效果。於每個循環加入 400 mM 的基質,combi-CLEAs 的海藻糖生產率約為8%。結果也顯示,combi-CLEAs 進行生產反應可重複五次循環並保持酵素活性穩定。
第三篇學者探討海藻糖毒性,在小鼠餵食海藻糖 (1.25、2.5、5g/kg) 持續五天觀察小鼠精子畸變、骨髓細胞微核、臟器、體量,結果顯示海藻糖毒性方面無不良影響。
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