黃耆混合寡醣及其乳酸發酵產物之生理活性探討
學生姓名:
黃立曄
指導教授:
潘崇良
學 號:
40342009
學期:
104下
摘 要:
本實驗計畫在探討 2 種黃耆多醣、2 組黃耆混合寡糖、2 組寡醣發酵液對三種雙醣酶抑制試驗、抗凝血反應、與抗腸病毒 (71 型) 之生理活性。海洋細菌與枯草細菌分離株 MA103、MAEF108、ST-BO-108、ST-BO-109、和 ST-BO-224,經白耆和紅耆粉末誘導 5 種酵素活性變化, MA103 得之澱粉酶酵素活性可達到 0.47 U 與 1.58 U,MA108 得之澱粉酶活性為 0.06 U 與 1.34 U,ST-BO-108 得之澱粉酶活性為 0.48 U 與 0.49 U,ST-BO-109 得之澱粉酶活性為 1.00 U 與 0.45 U,ST-BO-224 得之澱粉酶活性為 0.45 U 與 0.50 U。將上述分別 10 組誘導酵素水解中之 MA103 水解能力最佳,使白耆寡醣液之全糖量與還原糖量增加到 10.30 mg/mL 與 3.03 mg/mL,則紅耆寡醣液增加到 11.57 mg/mL 與 3.82 mg/mL 。經薄層色層分析 (thin layer chromatography, TLC) 之試驗結果顯示所得之白耆和紅耆熱萃多醣液含較多 2 醣,白耆及紅耆寡醣水解物皆含有 1-6 醣。以 HPLC 分析 4 組白耆熱萃液、紅耆熱萃液、白耆水解液、與紅耆水解液,結果得到白耆、紅耆熱萃液皆在 27.62 min (DP 1.5, M. W. 260.85 Da) 出現相同波峰時間,則白耆熱萃液比紅耆多了在 33.44 min (DP 0.13, M. W. 23.47 Da) 之波峰時間。參考高 (2014),將多醣與寡醣於 5 株乳酸菌發酵分別37oC 與 30 oC 於 30 hr 之結果顯示 Lb. plantarum BCRC12327 在 5 小時之 pH 值皆能降至 4.6 以下,且乳酸菌量皆能達到 107 CFU/mL。抗凝血試驗中 APS 在濃度5 mg/mL 對 APTT 延遲時間為 266 sec 並有明顯抑制凝結反應,APS 與 HPS 在濃度 5 mg/mL 對 PT 延遲時間為 66 sec 與 48 sec 皆有明顯抑制凝結反應。三種雙醣酶抑制試驗測試對於乳糖酶、麥芽糖酶、與蔗糖酶活性在 2 mg 濃度皆達到較佳抑制力,APS-1035K 與 HPS-1035K 分別較佳抑制乳糖酶為 190.91% 與 117.58%; 麥芽糖酶為 119.79% 與 86.56%; HPS 與 APS-1035K 抑制效果較佳蔗糖酶為 100.00% 與 76.48%。在抗腸病毒 71 型的試驗中顯示經預防處理組 HPS-1035K 濃度 0.2 g/mL 較佳可提升細胞存活率至 98%,治療處理組 APS-1035k-LFS 濃度 2 g/mL 較佳,可提升細胞存活率至 93%,共同處理組 APS-1035k 濃度 0.2 g/mL 較佳,可提升細胞存活率至92%。