不同預處理之幾丁質特性及製備幾丁質去乙醯酶
學生姓名:
董潔陵
指導教授:
蔡敏郎
學 號:
10532029
學期:
106下
摘 要:
本研究期望將幾丁質去乙醯化的方式朝向綠色製程、友善環境的方向發展，故以真菌 Colletotrichum lindemuthianum 基因合成生產重組幾丁質去乙醯酶，並分離純化以提高其活性。而一般幾丁質原料與酵素直接作用的效果並不好，因此先將幾丁質做不同預處理，期望有助於提升後續去乙醯化的成效。實驗結果顯示冷凍解凍對𝛼-幾丁質的去乙醯度及結晶度無顯著影響，但對𝛽 -幾丁質有些微去乙醯的效果；而超音波處理對𝛼 及 𝛽 -幾丁質皆有提升去乙醯度及降低結晶度的效果，TEM 結果也顯示超音波作用後幾丁質達奈米纖維等級，應有利於後續酵素作用。幾丁質去乙醯酶的活性方面，純化後的 E50 沖提液具有15.27 Unit/µL、E100 沖提液則有 14.59 Unit/µL，分別與未純化原液相比提升46.69%及 40.15%，顯示純化具有一定程度濃縮酵素的效果。進一步觀察不同培養時間下 1µL 幾丁質去乙醯酶的酵素活性變化，結果顯示於 58 h 時到達最高反應活性，此結果將作為爾後酵素及幾丁質作用時之條件參考。
5.23摘要.pdf