探討黑芝麻脂質或苦茶油減緩人類肝臟 HepG2 細胞脂質累積之作用
學生姓名:
劉奕德
指導教授:
張君如
學 號:
00239048
學期:
106下
摘 要:
非酒精性脂肪肝疾病 (non-alcoholic fatty acid liver disease, NAFLD) 係由肝脂肪變
性 (hepatic steatosis) 或脂肪肝 (fatty liver) 轉變為非酒精性肝 炎 (non-alcoholicsteatohepatitis)、 肝纖維化 (liver fibrosis)、 肝硬化 (hepatic cirrhosis)， 發展為肝癌 (hepatocellular carcinoma) 等 慢 性 肝 病 之 總 稱 ， 估 計 全 球 有 10 億人口罹患各式 NAFLD；而減緩脂質堆積為現行治療 NAFLD 策略之一。本研究目的為調查植物油對肝細胞脂質累積之調節作用。首先，以脂肪酸混合物 (oleic acid：palmitic acid = 2：1； FFA) 誘導人類肝臟 HepG2 細胞脂質堆積，以 148 μg/mL FFA 處理 48 小時細胞中性脂質含量顯著增加、且細胞存活率大於 80%，後續以此為誘導脂肪肝之細胞模式 (FFA 組)。當以黑芝麻脂質 (sesame oil, SO) 或苦茶油 (camellia oil, CO) 分別取代 74 μg/mL FFA，發現 SO 及 CO 可顯著延緩 FFA 誘導之中性脂質堆積，分別較 FFA 組下降 1.49 或 1.57 倍；148 μg/mL SO 組及 74 μg/mL CO 組細胞內三酸甘油酯分別較 FFA 組下降 1.35 及 1.63 倍。進一步分析發現 FFA 組之脂肪酸合成酶 (fatty acid synthase, FAS) 活性顯著高於 SO 及 CO 組 ， 但 各 組 的 乙 醯 輔 酶 A 羧 化 酶 (acetyl-CoA carboxylase) 未改變。以西方點墨法分析各組之 FAS 蛋白表現並無差異，但磷酸化AMP-activated protein kinase α (pAMPKα)/AMPKα 表現量在 74 μg/mL SO 組較 FFA 組上升 1.93 倍，以 74 μg/mL SO 或 CO 均可提升 pAMPKα 至 FFA 組之 2.59 或 2.94 倍，而且 AMPKα 所調節之 sterol regulatory element-binding protein 1 (SREBP-1)，於 74 μg/mL FFA + 74 μg/mL CO 組較 FFA 組下降 1.74 倍。此外，測定活性氧分子 (reactive oxygen species, ROS) 發現 SO 組皆較 FFA 組顯著下降，達 1.36~1.46 倍。最後，測定細胞發炎因子：介白素-8 (interleukin-8, IL-8)、腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor- α, TNF-α)，發現 SO 組或 CO 組其 IL-8、TNF-α 皆較 FFA 組無顯著差異。綜上，黑芝麻脂質及苦茶油可能透過抑制脂肪酸合成、促進熱量代謝，而達到減緩肝細胞脂質堆積之作用。
性 (hepatic steatosis) 或脂肪肝 (fatty liver) 轉變為非酒精性肝 炎 (non-alcoholicsteatohepatitis)、 肝纖維化 (liver fibrosis)、 肝硬化 (hepatic cirrhosis)， 發展為肝癌 (hepatocellular carcinoma) 等 慢 性 肝 病 之 總 稱 ， 估 計 全 球 有 10 億人口罹患各式 NAFLD；而減緩脂質堆積為現行治療 NAFLD 策略之一。本研究目的為調查植物油對肝細胞脂質累積之調節作用。首先，以脂肪酸混合物 (oleic acid：palmitic acid = 2：1； FFA) 誘導人類肝臟 HepG2 細胞脂質堆積，以 148 μg/mL FFA 處理 48 小時細胞中性脂質含量顯著增加、且細胞存活率大於 80%，後續以此為誘導脂肪肝之細胞模式 (FFA 組)。當以黑芝麻脂質 (sesame oil, SO) 或苦茶油 (camellia oil, CO) 分別取代 74 μg/mL FFA，發現 SO 及 CO 可顯著延緩 FFA 誘導之中性脂質堆積，分別較 FFA 組下降 1.49 或 1.57 倍；148 μg/mL SO 組及 74 μg/mL CO 組細胞內三酸甘油酯分別較 FFA 組下降 1.35 及 1.63 倍。進一步分析發現 FFA 組之脂肪酸合成酶 (fatty acid synthase, FAS) 活性顯著高於 SO 及 CO 組 ， 但 各 組 的 乙 醯 輔 酶 A 羧 化 酶 (acetyl-CoA carboxylase) 未改變。以西方點墨法分析各組之 FAS 蛋白表現並無差異，但磷酸化AMP-activated protein kinase α (pAMPKα)/AMPKα 表現量在 74 μg/mL SO 組較 FFA 組上升 1.93 倍，以 74 μg/mL SO 或 CO 均可提升 pAMPKα 至 FFA 組之 2.59 或 2.94 倍，而且 AMPKα 所調節之 sterol regulatory element-binding protein 1 (SREBP-1)，於 74 μg/mL FFA + 74 μg/mL CO 組較 FFA 組下降 1.74 倍。此外，測定活性氧分子 (reactive oxygen species, ROS) 發現 SO 組皆較 FFA 組顯著下降，達 1.36~1.46 倍。最後，測定細胞發炎因子：介白素-8 (interleukin-8, IL-8)、腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor- α, TNF-α)，發現 SO 組或 CO 組其 IL-8、TNF-α 皆較 FFA 組無顯著差異。綜上，黑芝麻脂質及苦茶油可能透過抑制脂肪酸合成、促進熱量代謝，而達到減緩肝細胞脂質堆積之作用。
10632001_劉奕德_seminar_摘要.pdf