評估龍鬚菜乙醇萃取物用於增強 carbenicillin 對弧菌之活性
學生姓名:
崔雅晴
學期:
108下
摘 要:
隨著抗藥性菌株的出現,用於治療病原性弧菌之抗生素中具有 β-lactam 環的penicillin 類抗生素容易被 β-lactamase 降解,造成治療效果逐漸變差,因此本篇研究擬以 Vibrio parahaemolyticus 與 V. cholerae 及其 β-lactamase 作為研究對象,評估龍鬚菜用於增強抗生素 carbenicillin 對弧菌活性之潛力。將三株 V. parahaemolyticus 與 V.cholerae 菌 株 進 行 藥 物 敏 感 性 試 驗 與 checkerboard 試 驗 , 結 果 顯 示 三 株 V.parahaemolyticus 皆對 carbenicillin (CAR) 具有抗性,V. cholerae 則對 CAR 表現敏感,皆不對龍鬚菜乙醇萃取物 (Gracilaria sp. extracts, GE) 與 potassium clavulanate 具有敏感性;同時對 V. parahaemolyticus 與 V. cholerae 使用 GE + CAR 時,抗生素的濃度比單獨使用時分別下降 8–16 倍與 2 倍。將 V. parahaemolyticus 與 V. cholerae 菌株中之VarG 與 VPA0477 分別經萃取與純化後,其動力學參數分別為 Vmax = 54.27 μM/min,Km = 9.58 mM,Kcat = 1.29 s-1 以及 Kcat/Km = 1.35×102 M-1 s-1;Vmax = 10.10 μM/min,Km= 5.47 mM,Kcat = 673.43 s-1 以及 Kcat/Km = 1.23×105 M-1s 22 -1。將 VarG 與 VPA0477 以nitrocefin 作為受質並分別以 GE 進行 β-lactamase 活性抑制試驗,實驗結果顯示 GE對 VPA0477 不具有抑制作用;GE 在濃度為 1–10 μg/mL 時,反應 25 分鐘後仍可顯著抑制 2.8 μM VarG 之活性,使其活性降低為 26–34%。綜合以上內容可知龍鬚菜本身不具有殺菌活性,與 carbenicillin 共同使用下可以降低其使用劑量,推測其以抑制 β-lactamase 為作用之機制,且有潛力應用於增強 carbenicillin 對弧菌之活性。