三種堅果類蛋白水解物中抗氧化肽的純化與 鑑定及其抗氧化活性之探討
學生姓名:
林楚娣
指導教授:
張祐維
學期:
110上
摘 要:
抗氧化肽 (Antioxidant peptides) 為具有抗氧化性質的活性胜肽，能清除體內過剩的自由基與活性氧分子 (Reactive oxygen species, ROS) 維持細胞的正常結構與功能並預防疾病的發生。抗氧化肽的來源之一為天然植物蛋白，其首先被水解形成蛋白水解物，然後透過超過濾 (Ultrafiltration, UF) 以及三種層析方式分別為凝膠過濾層析 (Gel filtration chromatography, GFC)、離子交換層析 (Ion exchange chromatography, IEC) 及逆相高效液相層析 (Reversed phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC) 進行肽段純化，並透過液相層析串聯質譜儀 (Liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS) 進行鑑定，最後探討抗氧化活性。本研究為探討三種堅果類的蛋白水解物中抗氧化肽的純化與鑑定方法及其抗氧化活性。榛果 (Corylus heophylla Fisch) 以鹼性蛋白酶 (Alcalase) 水解，從水解物中鑑定並篩選出六種抗氧化肽，均顯示出高抗氧化活性，其中以 ADGF 片段的 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) 與 α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl (DPPH) 的自由基清除能力最強。從 Alcalase 製備的板栗 (Castanea mollissima Blume) 蛋白水解物中分離並純化出五種新的抗氧化肽，經體外模擬消化後均保留良好的抗氧化活性，其中 VYTE 和 VSAFLA 片段顯示出最高的 ABTS 自由基清除能力，IC50 值分別為 0.13 ± 0.01 和 0.28 ± 0.04 mg/mL。芝麻 (Sesamum indicum L.) 蛋白經 Alcalase 和胰蛋白酶 (Trypsin) 組成的雙酶系統水解，從水解產物中分離並鑑定出七種抗氧化肽，其中 SYPTECRMR 片段表現出最高的抗氧化活性，DPPH和ABTS的 IC50 值分別為 0.105 mg/mL 和 0.004 mg/mL。綜上所述，從三種堅果類蛋白水解物分離出之抗氧化肽具有高抗氧化活性，在功能性食品或藥物中具有潛在的應用價值。
110.11.24_專題討論書面報告_林楚娣 (2).pdf