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超音波預處理對蛋白質水解物之物化特性與血管收縮素轉換酶 (ACE) 抑制能力的影響

學生姓名: 陳禹辰
指導教授: 陳冠文
學期: 111上
摘  要: 心血管疾病 (Cardiovascular disease, CVD) 是全球主要的死亡原因之一,其中高血壓 (Hypertension) 為主要導致的原因。血管收縮素 I 轉換酶 (Angiotensin Iconverting enzyme, ACE) 會催化血管收縮素 I 轉化為血管收縮素 II (AngiotensinII),從而使血管收縮與血壓上升。ACE 抑制藥物會產生許多副作用,因此尋找天然來源之抑制 ACE 的活性胜肽已受到重視。活性胜肽透過酵素水解法製備,具有高特異性且不殘留有機溶劑。超聲波 (Ultrasound, US) 會引起空泡效應 (Cavitation)能產生高剪切力,進而破壞非共價鍵,有助於增加酵素結合位點,以提升活性胜肽的萃取效果。山羊乳蛋白經 200 W, 24 kHz, 20 min 與振幅 80% 預處理後經Neutral protease 水解,其水解率 (Degree of hydrolysis, DH) 與可溶性蛋白 (Solubleprotein) 濃度皆有提升,並使用逆相超高效能液相層析法 (Reverse phase ultra highperformance liquid chromatography, RP-UHPLC) 沖提後,F3:EPr 劃分物具有最高ACE 抑制率。葵花籽蛋白經 220W, 20/40 kHz 與 15 min 預處理後蛋白質表面疏水性 (Surface hydrophobicity) 提升,且其經 Alcalase 水解後,DH 與蛋白質轉換率 (Conversion rate, CR) 及控制組相比皆有提升,於水解時間為 75 min 得最高的ACE 抑制率。乳清蛋白經 300W, 20 kHz 及 15 min 預處理後蛋白質表面游離硫氫基 (Sulfhydryl group) 含量提升,且其經 Alcalase 水解後 DH 與控制組相比有提升效果,而 ACE 之 IC50 值有下降趨勢。綜合上述結果得知,經 US 預處理對三種蛋白質之物化特性皆有改變如蛋白質表面疏水性及表面游離硫氫基含量提升,並且可以透過 US 預處理改善酵素水解物之 ACE 抑制效果。
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