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探討菟葵毒對動物模式之危害及不同測量方式

學生姓名: 詹暉安
指導教授: 黃登福
學期: 110下
摘  要: 菟葵毒 (palytoxin , PLTX) 及其類似物是一種海洋中複雜的多元醇毒素,其可以透過在海洋生物體內累積,進入食物鏈的循環。PLTX 毒素之作用方式為干擾生物體細胞膜上的 Na+, K+-ATPase,抑制 Na+ 和 K+ 跨細胞膜的轉運,導致粒線體受損及造成細胞死亡。某些雙鞭毛藻 (dinoflagellate)、海葵、珊瑚及藍綠藻 (cyanobacteria) 會產生 PLTX 及其類似物,在食物鏈中累積。食用後會造成中毒,產生肌肉疼痛、虛弱、發燒、噁心及嘔吐等症狀。歐洲食品安全局 (European Food Safety Authority, EFSA) 於 2009 年根據數據,得出急性參考劑量 (acute reference dose, ARfD) 為 0.2 µg/kg bw,並且建議開發合適的檢測方式。由於PLTX 之分子結構很大,所以不易分析。在本篇報告中比較兩種不同的 PLTX 檢測方法,且對小鼠管餵及腹腔注射的急毒性研究進行探討。在動物實驗中,向小鼠施行管餵及腹腔注射,並觀察 96 小時。發現腹腔注射和管餵毒素之 LD50 沒有隨著觀察時間的延長而增加,且管餵毒素之 NOAEL 比其他研究描述的低 10倍以上。在另外兩篇文獻中,皆開發新的測定法。其中一篇使用細胞免疫酶法定量菟葵毒素的新型測定法,其評估 PLTX 的偵測極限 (limit of detection, LOD) 及定量極限 (limit of quantification, LOQ) 為 1.2 × 10−11 M (32.2 pg/mL) 及 2.8 ×10−11 M (75.0 pg/mL),具有良好的準確度及可重複性。且能夠以低於 EFSA 建議
的最大限值 (30 µg/kg PLTX 貝類肉) 的濃度對貽貝中的 PLTX 進行量化。另一種新技術為使用碘鋰和甲酸作為液相色譜與串聯質譜 (liquid chromatographymass spectrometry, LC-MS/MS) 移動相添加劑的方法來分析 PLTX,透過鋰的陽離子化提高靈敏度。貽貝和牡蠣的 LOD 分別為 8 µg/kg 和 22 µg/kg PLTX。此方法與過去文獻中的 LC-MS 方法相比,有更高或相當的靈敏度及更簡化的光譜。以上兩種方法皆提高了測定 PLTX 之靈敏度,對毒素概況有更好的分析能力。
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