探討不同來源之α-L-鼠李糖苷酶的特性及應用
學生姓名:
向宇晴
指導教授:
方翠筠
學期:
111下
摘 要:
α-L-鼠李糖苷酶 (α-L-rhamnosidase) 為一水解酶，水解聚糖或者糖苷類化合物末端的α-1, 2、α-1, 3、α-1, 4 和α-1, 6 糖苷键，並釋放 L-鼠李糖，包括水解芸香苷、柚皮苷、槲皮素和橙皮苷……等天然糖苷，其已在工業上用於去除柑橘類果汁的苦味和增強葡萄酒香氣，不同來源的α-L-鼠李糖苷酶在最適溫度、熱穩定性和基質特異性等方面皆不盡相同，而性質的不同會影響其在工業上之應用，故本篇目的為探討不同來源之α-L-鼠李糖苷酶的特性及應用。由結果可知，Thermotoga maritima (Tm_Ram106B) 、Thermotoga neapolitana (Tn_Ram106B) 、Caldicellulosiruptor bescii (Cb_Ram106B) 和 Thermoclostridium stercorarium (Ts_Ram106B) 最適溫度分別為86.5oC、84oC、70oC 和 50o 21 C，在不同 pH 值環境下，Tm_Ram106B 90% 以上之相對活性在 pH5.5-6.6 之間，Tn_Ram106B 和 Cb_Ram106B 最高相對活性之 pH 值範圍分別為pH5.6-6.3 和 pH5.0-6.3，而 Ts_Ra m106B 最高相對活性是在 pH5.0 的蘋果酸鹽緩衝溶液中測出，在添加不同金屬離子環境下，Tm_Ram106B、Tn_Ram106B 和 Cb_Ram106B 活性增加最高的是鈷離子，而 Ts_Ram106B 活性增加最高的是鎳離子；來自 Chloroflexus aurantiacus 的α- L -鼠李糖苷酶在 pH6.0、50o 26 C 時活性最高，且其生 產異槲皮苷隨著 α- L -鼠李糖苷酶濃度的增加而增加；來自 Penicillium tardum 之α-L鼠李糖苷酶在 pH 5.0、60o C 時活性最高，且其可有效水解柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、 蘆丁、柚皮苷和 p-NPRham，高效能液相層析法 (High Performance Liquid Chromatography, HPLC)測定 P. tardum α-L-鼠李糖苷酶水解產物，在 50o 30 C 下水解 1 小時，葡萄柚汁及柚子汁中柚皮苷濃度顯著降低，而柚皮素單葡萄糖苷顯著上升，由上述結果可知，T. maritima、T. neapolitana、C. bescii、T. stercorarium、C. aurantiacus 和 P. tardum 皆可有效生成α-L-鼠李糖苷酶，於上述α-L-鼠李糖苷酶中，皆測定出其最適溫度及最適 pH 值，並可水解柚皮苷、芸香苷及橙皮苷等類黃酮化合物，未來可針對不同來源之α-L-鼠李糖苷酶所表現之特性進行應用。
11132031_向宇晴_摘要.pdf